淋巴瘤的免疫标记对比一个体力活
对于一个复杂形态的淋巴增殖性疾病，明确增殖细胞类型——是T或B，或是非T非B，并不是非常直观。增生占优势地位的不见得是肿瘤细胞、增殖活性高的也不见得是肿瘤细胞、R-S样细胞形态的还是不见得是肿瘤细胞。富于T细胞/组织细胞的大B细胞淋巴瘤，肿瘤B细胞总数少于10%，其余90%的T细胞及组织细胞。血管免疫母细胞性T细胞淋巴瘤，肿瘤细胞可能只占细胞总数的5%，其余增生的是B细胞、组织细胞、嗜酸性粒细胞、浆细胞及浆母细胞。在血管免疫母细胞性T细胞淋巴瘤中，免疫母细胞往往是高增殖，而躲在各种角落里面的肿瘤细胞难以寻找，判断其增殖活性极为困难，其增殖活性一般低于免疫母细胞。血管免疫母细胞性T细胞淋巴瘤、传染性单核细胞增多症，这些疾病里面均可见到R-S样细胞，且EBER阳性，具有霍奇金淋巴瘤样的免疫表型，但这些R-S样细胞不是肿瘤性。增生期的组织细胞性坏死性淋巴结炎可以出现非常高的增殖活性，同样的情况也可以出现在传染性单核细胞增多症，因此高增殖活性不见得是肿瘤，反过来说，低增殖活性也不见得不是肿瘤。
作为淋巴瘤初筛套餐“非常6+1”，就是通过有限的抗体，观察淋巴结的免疫结构有无破坏，T/B细胞的分布有无异常，有无淋巴滤泡残留，有没有隐藏在炎症背景中的大细胞，是否存在EBV感染，T细胞大小有无改变，淋巴滤泡的套区是否存在，有无异常增殖，T细胞有无异常表型等等，为病理诊断寻找方向，像这个病例形态我常规加上PD1。结合免疫结构，再观察HE切片，判断是淋巴滤泡的病变还是滤泡间区病变，淋巴窦内有无异常，被膜有无浸润。分解动作就是看T细胞：大小、CD3的表达强度，有无异常增殖，有无异常表达PD1等；B细胞：滤泡内外B细胞的分布，滤泡间区B细胞的表达是否具有异质性，有无大细胞表达CD0，被膜外B细胞表达情况，有无异常增殖，与FDC网的关系。T、B细胞总数占淋巴结细胞数的比例，不表达CD3及CD0的细胞类型，这些细胞的增殖活性，与FDC网的关系。CD30阳性细胞的数量、分布及细胞大小，表达强度，与FDC网的关系。PD1阳性细胞数量、位置、强度，与淋巴滤泡的关系。
通过这种以某个指标进行定位，然后观察相同区域HE形态，其他标记的表达情况，分析淋巴结内增生细胞类型，每一个指标对应一组图像，这个指标需要观察数个点，组合下来是巨大的工作量，有时候显微镜下定位不精准的时候，就必须采图来对比。一个复杂形态的淋巴结，我看下来少则半个小时，多则-3个小时甚至更长。这种了解不同细胞的抗原表达情况，与流式细胞术的设门有些类似，但是流式细胞术结果观察比组织学简单多了，当然流式细胞术的设门也是一个技术活。我曾经对数家图像扫描设备厂家提出过要求，希望他们的图像扫描软件能够有免疫组化染色切片进行自动定位、同步浏览、图像拉伸、对比图像输出、录屏、标记等功能，这样可以方便直观对比各个指标的表达情况，减少图像采集的工作量（现在写