鉴别单克隆T淋巴细胞,可以如此简单
一个抗体鉴别单克隆T淋巴细胞
T细胞淋巴肿瘤（如T淋巴母细胞淋巴瘤、T幼淋巴细胞白血病、大颗粒T淋巴细胞白血病、成人T淋巴细胞白血病、血管免疫母细胞淋巴瘤，外周T细胞淋巴瘤等）的诊断及鉴别诊断，能否检测到单克隆T淋巴细胞是非常重要的依据之一。
目前，检测单克隆T淋巴细胞主要有两种手段。一种方法是TCR重排检测，即用毛细血管电泳法检测TCRB、TCRG及TCRD基因重排。但是，TCR重排的特异性并不好，如病毒感染（如EBV、HIV等）、一些自身免疫性疾病（如风湿性关节炎）、免疫缺陷状态（如移植后病人、先天性免疫缺陷病等）都会导致TCR重排阳性。另外一种方法是流式细胞术检测TCR-Vβ，但其对T细胞肿瘤的单克隆只有75%左右发覆盖率，而且价格较贵，操作也比较麻烦，不适合临床常规使用。今天，我们给大家介绍一个抗体——TRBC1，可以比较方便、有效的鉴别出是否为单克隆T淋巴细胞。
1●TRBC1详解
●T细胞表面的TCR主要由α和β两个亚基组成，其中TRAC基因编码α亚基核恒定区域，TRBC1基因及TRBC2基因编码β亚基恒定区域。也就是说，正常成熟T细胞的TCRβ链含有TRBC1和TRBC2两种蛋白（图一）。而肿瘤性T细胞由于单克隆起源，所以β链仅含有TRBC1或TRBC2单一类型。来自美国的NatashaND等专家，将TRBC1应用于单克隆T淋巴细胞的诊断及鉴别诊断。他们发现，TRBC1可以帮助鉴别出单克隆T淋巴细胞（图二）。而且，结合其他T细胞相关抗原，可以发现小群体的单克隆T细胞（图三）。
图一正常T细胞CD8/TRBC1散点图，横坐标显示CD8+T和CD8-T（可以认为CD4+T），纵坐标为TRBC1表达情况。正常T淋巴细胞TRBC1呈多克隆性表达，TRBC1表达比例大于85%或小于15%时认为是单克隆性表达，类似于B淋巴细胞的Kappa和Lambda轻链。
图二A：Sézary综合征中，CD4+T细胞TRBC1呈单克隆表达；B：Sézary综合征中，CD4+T细胞TRBC1呈单克隆表达，而剩余正常的CD8+T细胞，TRBC1呈多克隆表达；C：T-LGLL中，CD8+T细胞TRBC1呈单克隆表达；D：T-LGLL中，CD8+细胞TRBC1呈单克隆表达，而剩余正常的CD4+T细胞，TCRB1呈多克隆表达。
图三可见到CD4+/CD8+dim(蓝色）的异常T细胞TRBC1呈单克隆表达；而正常CD4+T淋巴细胞（绿色）、CD8+T淋巴细胞（红色）的TRBC1呈多克隆表达。
2●病例展示●病例一
12岁，男性，发热2周，颈部淋巴结肿大，脾大，白细胞升高，以淋巴细胞升高为主。流式可以检测到一群CD3+/CD4-/CD7-/CD8dimT淋巴细胞。经设门分析，该群细胞（图四紫色群）TRBC1呈多克隆表达；该患者最终诊断为传染性单核细胞增多症，三周后自愈。图四病例二
55岁老年女性，全血细胞减少入院。流式可见一群CD4-/CD8+/CD5dim的异常T淋巴细胞；经设门分析，发现CD5+T淋巴细胞TRBC1呈多克隆表达，CD5dimT淋巴细胞TRBC1呈单克隆表达（2.41%），因此认为CD4-/CD8+/CD5dimT淋巴细胞为单克隆T淋巴细胞，该群细胞同时表达CD57，不除外为大颗粒T淋巴细胞白血病。图五TRBC1对于单克隆T细胞的诊断及鉴别诊断是一种行之有效的方法，对于T细胞淋巴瘤的MRD监测也有比较好的效果，而且操作及结果判定也比较简单，现在我们实验室已经把这个抗体作为T-NHL的流式panel常规抗体了。但在临床应用中，也需要注意以下几点：
1、非肿瘤增殖的反应性T淋巴细胞TRBC1也可能出现单克隆性表达，原因是当机体感染或应激时，某些发挥相同功能的T淋巴细胞小亚群短时间内大量增殖。所以仅靠TRBC1表达与否不能完全诊断T淋巴细胞群是否为单克隆增生，需要结合T细胞的免疫表型异常表达情况，必要时再结合TCR基因分子重排检测、流式TCR-Vβ检测来综合评估T细胞克隆性，并结合患者临床病史及其他检查包括形态学、免疫学、细胞遗传学、分子生物学等来综合分析T细胞为反应性增生还是肿瘤性增生。
2、部分细胞肿瘤性T淋巴细胞如果TCR不表达，或者只表达TCRγδ，也是不合适用TRBC1来判断单克隆性的。
参考文献：
NovikovND,GriffinGK,DudleyG,etal.UtilityofaSimpleandRobustFlowCytometryAssayforRapidClonalityTestinginMaturePeripheralT-CellLymphomas.AmJClinPathol.Jan31.
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